Técnicas de edición genómica

Aunque en la tetralogia de Fallot no se ha desarrollado este tipo de estudios, en las cardiopatías congénitas en general sí se los esta haciendo. Se está usando el CRISPR/Cas-9 para la edición de genes involucrados en el desarrollo cardíaco, (y también cerebral) para el estudio y el aporte de más conocimientos acerca de el origen genético de las malformaciones cardíacas congénicas y posiblemente la manera de evitar que se produzcan mediante la edición genómica.

Fuente: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30526868

Terapia regenerativa en tetralogía de Fallot

Se han realizado estudios y tratamientos de las cardiopatias congénitas utilizando la terapia regenerativa. Se ha utilizado células mononucleares (stem cells) de sangre autóloga del cordón umbilical, las cuales han sido transferidas al miocardio del ventrículo derecho para la terapia regenerativa dando resultados favorables y así mejorar el rendimiento y asegurar el funcionamiento de esta estructura cardíaca en cardiopatías congénitas como la tetralogía de Fallot.

Fuente: http://sci-hub.tw/10.3727/096368909X471170

Ejemplo de transgénico animal en la tetralogía de Fallot y otras cardiopatías

Últimamente en las cardiopatías se están estudiando mutaciones de genes, en este estudio se analiza la falla de función del ROBO1 mediante la realización de ratas transgénicas en donde a una la desarrollan con un tipo de variación del gen ROBO1 y a la otra con otra. Gracias a esto se puede estudiar las anomalías cardíacas de las ratas transgénicas con genes mutados, por ejemplo en el segundo modelo transgénico ROBO1-/- se logró detectar defecto del tabique ventricular.

Ventajas y desventajas de los transgénicos

(elaborado por autor)

Fuente: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28592524

Recombinación del ADN natural y artificial

Existen recombinaciones del ADN que se dan en la naturaleza y un ejemplo de ello vendría siendo la transformación de ADN en las bacterias. En el caso de la tetralogía de Fallot los factores epigenéticos pueden influir para desarrollar el síndrome de Digeorge en donde se induce una recombinación en algunos genes LCR's provocando alteraciones cromosómicas y causando este síndrome que como se sabe es uno de los mayores predisponentes para tetralogía de Fallot.

Fuentes: https://books.google.com.ec/books?id=uO48-6v7GcoC&pg=PA244&lpg=PA244&dq=adn+recombinante+natural+en+animales&source=bl&ots=vVqAHR1OZy&sig=9Es5OgTCTqM5nGAMMrOTuQ61gpU&hl=es&sa=X&ei=RS6gUPv3FIKQ9QSQwIDYCg#v=onepage&q=adn%20recombinante%20natural%20en%20animales&f=false

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26991864

Aplicación de hibridación ergonómica comparativa de matrices (microarray) en la tetralogía de Fallot.

Se han aplicado técnicas de hibridación, en este caso el microarray, para analizar los cariotipos de pacientes que con tetrallogía de Fallot y determinar si existen mutaciones de genes o variaciones en el numero de copias confirmando para determinar la patogénesis y determinar diagnóstico prenatal. Se utilizan chips que contienen aproximadamente 60,000 sondas y se analizan mediante escáneres para identificar los genes mutados y el número variado de copias.

Fuente: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27930557

Prueba de PCR en pacientes con tetralogía de Fallot

TEMA: Tetralogía familiar de fallot causada por mutación en el gen jagged1

OBJETIVO: Determinar individuos afectados por mutaciones del gen Jag1 con tetralogía de fallot familiar

MUESTRA: Sangre

ÁCIDO NUCLÉICO: DNA genómico

GENES: JAG1 (pares de bases no descritas)

EXTRACCIÓN DEL ÁCIDO NUCLÉICO: Mediante Qiaamp DNA mini kit 
      -Lisis (proteinasa k)
      -Separación NO necesaria
      -Purificación (utilizando las columnas de giro QIAamp Mini en una microcentrífuga, en un colector de vacío, o en el QIAcube)

PCR: PCR estandar
      35 ciclos
  Desnaturalización previa a 94° por 5 minutos
      -Desnaturalización: 94° por 30 segundos
      -Alineamiento: 60° por 30 segundos
      -Extracción: 72° por 30 segundos
  Extración final a 72° por 10 minutos

VISUALIZACIÓN: Electroforesis en gel de agarosa

ESPECIFICIDAD Y SENSIBILIDAD: no descritos

Fuente: http://sci-hub.tw/10.1093/hmg/10.2.163
https://www.qiagen.com/jp/resources/download.aspx?id=62a200d6-faf4-469b-b50f-2b59cf738962&lang=en

Prueba de tamizaje y confirmatoria para la tetralogia de Fallot

Referencias: http://www.medigraphic.com/pdfs/residente/rr-2015/rr152f.pdf
                     http://www.medigraphic.com/pdfs/cardio/h-2013/h132d.pdf