Técnicas de edición genómica

Aunque en la tetralogia de Fallot no se ha desarrollado este tipo de estudios, en las cardiopatías congénitas en general sí se los esta haciendo. Se está usando el CRISPR/Cas-9 para la edición de genes involucrados en el desarrollo cardíaco, (y también cerebral) para el estudio y el aporte de más conocimientos acerca de el origen genético de las malformaciones cardíacas congénicas y posiblemente la manera de evitar que se produzcan mediante la edición genómica.

Fuente: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30526868

Terapia regenerativa en tetralogía de Fallot

Se han realizado estudios y tratamientos de las cardiopatias congénitas utilizando la terapia regenerativa. Se ha utilizado células mononucleares (stem cells) de sangre autóloga del cordón umbilical, las cuales han sido transferidas al miocardio del ventrículo derecho para la terapia regenerativa dando resultados favorables y así mejorar el rendimiento y asegurar el funcionamiento de esta estructura cardíaca en cardiopatías congénitas como la tetralogía de Fallot.

Fuente: http://sci-hub.tw/10.3727/096368909X471170

Ejemplo de transgénico animal en la tetralogía de Fallot y otras cardiopatías

Últimamente en las cardiopatías se están estudiando mutaciones de genes, en este estudio se analiza la falla de función del ROBO1 mediante la realización de ratas transgénicas en donde a una la desarrollan con un tipo de variación del gen ROBO1 y a la otra con otra. Gracias a esto se puede estudiar las anomalías cardíacas de las ratas transgénicas con genes mutados, por ejemplo en el segundo modelo transgénico ROBO1-/- se logró detectar defecto del tabique ventricular.

Ventajas y desventajas de los transgénicos

(elaborado por autor)

Fuente: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28592524

Recombinación del ADN natural y artificial

Existen recombinaciones del ADN que se dan en la naturaleza y un ejemplo de ello vendría siendo la transformación de ADN en las bacterias. En el caso de la tetralogía de Fallot los factores epigenéticos pueden influir para desarrollar el síndrome de Digeorge en donde se induce una recombinación en algunos genes LCR's provocando alteraciones cromosómicas y causando este síndrome que como se sabe es uno de los mayores predisponentes para tetralogía de Fallot.

Fuentes: https://books.google.com.ec/books?id=uO48-6v7GcoC&pg=PA244&lpg=PA244&dq=adn+recombinante+natural+en+animales&source=bl&ots=vVqAHR1OZy&sig=9Es5OgTCTqM5nGAMMrOTuQ61gpU&hl=es&sa=X&ei=RS6gUPv3FIKQ9QSQwIDYCg#v=onepage&q=adn%20recombinante%20natural%20en%20animales&f=false

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26991864

Aplicación de hibridación ergonómica comparativa de matrices (microarray) en la tetralogía de Fallot.

Se han aplicado técnicas de hibridación, en este caso el microarray, para analizar los cariotipos de pacientes que con tetrallogía de Fallot y determinar si existen mutaciones de genes o variaciones en el numero de copias confirmando para determinar la patogénesis y determinar diagnóstico prenatal. Se utilizan chips que contienen aproximadamente 60,000 sondas y se analizan mediante escáneres para identificar los genes mutados y el número variado de copias.

Fuente: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27930557

Prueba de PCR en pacientes con tetralogía de Fallot

TEMA: Tetralogía familiar de fallot causada por mutación en el gen jagged1

OBJETIVO: Determinar individuos afectados por mutaciones del gen Jag1 con tetralogía de fallot familiar

MUESTRA: Sangre

ÁCIDO NUCLÉICO: DNA genómico

GENES: JAG1 (pares de bases no descritas)

EXTRACCIÓN DEL ÁCIDO NUCLÉICO: Mediante Qiaamp DNA mini kit 
      -Lisis (proteinasa k)
      -Separación NO necesaria
      -Purificación (utilizando las columnas de giro QIAamp Mini en una microcentrífuga, en un colector de vacío, o en el QIAcube)

PCR: PCR estandar
      35 ciclos
  Desnaturalización previa a 94° por 5 minutos
      -Desnaturalización: 94° por 30 segundos
      -Alineamiento: 60° por 30 segundos
      -Extracción: 72° por 30 segundos
  Extración final a 72° por 10 minutos

VISUALIZACIÓN: Electroforesis en gel de agarosa

ESPECIFICIDAD Y SENSIBILIDAD: no descritos

Fuente: http://sci-hub.tw/10.1093/hmg/10.2.163
https://www.qiagen.com/jp/resources/download.aspx?id=62a200d6-faf4-469b-b50f-2b59cf738962&lang=en

Prueba de tamizaje y confirmatoria para la tetralogia de Fallot

Referencias: http://www.medigraphic.com/pdfs/residente/rr-2015/rr152f.pdf
                     http://www.medigraphic.com/pdfs/cardio/h-2013/h132d.pdf

Epigenómica de la Tetralogía de Fallot

                               

Se discute que esta patología puede desarrollarse por factores epigenéticos, como la alimentación, las infecciones, fumar, la radiación etc. Un factor importante que cabe mencionar es la diabetes gestacional en donde la dieta de las mujeres embarazadas no es adecuada por el bajo consumo de minerales y antioxidantes y puede ser causa de malformación cardíaca. Se hicieron análisis de la expresión genética y microRNAs para saber que factores pueden afectar al corazón del feto. 

Fuente: https://cordis.europa.eu/result/rcn/90135_es.html

No existe alteración el el proceso de traducción en la Tetralogía de Fallot

La tetralogía de Fallot, enfermedad congénita de la morfología y funcionalidad del corazón, presentó su alteración en los factores de transcripción, por lo tanto, la alteración en sí se encuentra en el proceso de transcripción del ADN mas no en la traducción. En la traducción no presenta una alteración como tal en su proceso, sin embargo, al no haber una buena transcripción habrá consecuencias en la síntesis de proteínas en las células cardíacas al momento de la traducción.

Fuente (alteraciones en la transcripción) :https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29568912

Alteraciones en la transcripción del ADN en cardiopatías congénitas como la tetralogía de Fallot

                           

Los factores de transcripción son proteínas que regulan y controlan este proceso pero en algunos casos puede haber mutaciones en los genes que las codifican. En el corazón son muy importantes los factores de homeobox (Nkx2.5, Nkx2.6), los de Tbox (TBX1, TBX5, TBX20) y los GATA (GATA4, GATA5, GATA6), elementos que son esenciales para regular la transcripción del ADN en las células cardíacas.

Fuente:http://www.scielo.edu.uy/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1688-04202014000300018

Alteración en la genómica de la tetralogía de Fallot

En la tetralogía de Fallot y en otras cardiopatias se dan funcionamientos deficientes de factores de gran importancia. El factor homeobox NKX2-5 el cual participa en la transcripción de ADN y también el gen Jag 1 que participa en las rutas de señalización pueden fallar al momento de la transcripción del ADN y la expresión de genes, ocasionando este tipo de anomalía. También se asocian alteraciones cromosomas de síndromes como el de Down o el de Cri Du Chat.

Fuente: http://repository.urosario.edu.co/bitstream/handle/10336/18150/2.%20TESIS%20DEFINITIVA%20-%20AN%C3%81LISIS%20GEN%C3%93MICO%20EN%20PACIENTES%20CON%20ANOMAL%C3%8DA%20DE%20EBSTEIN.pdf?sequence=1&isAllowed=y

Tetralogía de Fallot

Es una malformación cardíaca congénita que reúne cuatro modificaciones anatómicas: defecto septal ventricular, cabalgamiento de la aorta, una obstrucción en el tracto de salida del ventrículo derecho e hipertrofia ventricular derecha. Es la cardiopatía más conocida, más compleja y más tratada de los últimos años. El diagnóstico se debe realizar mediante un ecocardiograma transtorácico. Sin cirugía la sobrevivencia del paciente es muy pobre y se relaciona inversamente con el grado de obstruccion pulmonar que se provoca.

Fuente: http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0188-21982013000200004

Bienvenido a mi portafolio de biología molecular, esta ciencia estudia las interacciones y entendimiento de las diferentes partes de una célula, incluye estudios de DNA y RNA, reacciones metabólicas; estructura y funcionamiento de las moléculas de importancia biológica e intenta explicar el funcionamiento y los fenómenos de la vida en base a propiedades macromoleculares. 

https://es.wikipedia.org/wiki/Biolog%C3%ADa_molecular